Titelaufnahme

Titel
Validierung einer durchflusszytometrischen Methode zur Bestimmung der intrazellulären Signalwegaktivierung
Weitere Titel
Validation of a Flow Cytometric Method for Determination of Intracellular Signal Pathway Activation
VerfasserBreitler, Romana
Erschienen2013
Datum der AbgabeJuli 2013
SpracheEnglisch
DokumenttypBachelorarbeit
Schlagwörter (DE)Durchflusszytometrie / Validierung / Akute Myeloische Leukämie / Immunologische Diagnostik / Signalwegaktivierung
Schlagwörter (EN)Flow Cytometry / Validation / Acute Myeloid Leukemia / Immunological Diagnostics / Activation of Signalling Pathways
Zugriffsbeschränkung
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Klassifikation
Zusammenfassung (Deutsch)

Das Ziel dieser Arbeit ist die Validierung einer bereits etablierten durchflusszytometrischen Methode zur Bestimmung der Phosphorylierung von intrazellulären Signalmolekülen. Mit dieser Methode können hochexprimierte Signalwege in akuter myeloischer Leukämie im Kindesalter routinemäßig beschrieben werden. Sie ermöglicht gleichzeitig die Ermittlung von stimulierenden und inhibierenden Effekten bestimmter Zellsignale.

Für die Validierung wurde das Immunoblotting als Referenzmethode gewählt. Im Allgemeinen konnten die durchflusszytometrischen Resultate mittels Immunoblot bestätigt werden. In Hinblick auf Durchführbarkeit, Zeit- und Materialaufwand, bietet die Durchflusszytometrie viele Vorteile gegenüber dem Immunoblot und ist demnach die Methode der Wahl.

Zusammenfassung (Englisch)

The aim of this thesis is the validation of an already established flow cytometric method to determine phosphorylation of intracellular signalling molecules. With this method highly expressed signalling pathways in childhood acute myeloid leukemia can be routinely described. It simultaneously enables the measurement of stimulating and inhibiting effects on certain cell signalling.

For validation, immunoblotting was chosen as reference method. Overall, results obtained by flow cytometry could be confirmed by immunoblotting. In regards of feasibility, time expenditure and material requirements, flow cytomerty provides many advantages over immunoblot, thus flow cytometry was found to be the method of choice.