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Title
Nachweis von HLA spezifischen, Complement bindenden Antikörpern in Nieren transplantierten Patienten
Additional Titles
Monitoring of HLA-Specific Complement-Binding Antibodies with PE-Conjugated Anti-C1q in Kidney Transplanted Patients
AuthorBhandal, Arshdeep Kaur
Thesis advisorStöckl, Martina
Published2016
Date of SubmissionJune 2016
LanguageEnglish
Document typeBachelor Thesis
Keywords (DE)C1q- Screen / Luminex- based single antigen bead assay / komplementabhängiger Zytotoxizitätstest / Nierentransplantationen / HLA- Antikörper
Keywords (EN)C1q- Screen / Luminex- based single antigen bead assay / Complement- dependent cytotoxicity test / Kidney transplantation / HLA- antibodies
Restriction-Information
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Classification
Abstract (German)

HLA-Antikörper im Serum eines Organempfängers gegen HLA-Antigene eines Spenders stellen einen Risikofaktor bei Transplantationen dar. Um die bestmöglichen Ergebnisse bei Transplantationen zu erzielen und hyperakute Abstoßungen zu verhindern, wird vor einer geplanten Transplantation das Serum des Empfängers auf diese Antikörper getestet. Die derzeit verwendeten Methoden zur Bestimmung dieser Antikörper sind der komplementabhängige Zytotoxizitätstest und der im Vergleich dazu viel sensitivere und spezifischere Bead- basierte Luminex Single Antigen Bead Assay. Als mögliche Alternative für den Zytotoxizitätstest wird der neue C1q-Screen von der Firma One Lambda, US gesehen, der die Vorteile beider Methoden in einem Test vereinen soll. Das Ziel dieser Studie ist die Validierung dieses neuen Kits für den routinemäßigen Gebrauch in der Universitätsklinik für Blutgruppenserologie und Transfusionsmedizin, Medizinische Universität Wien, in einem Probenkollektiv von 30 Patientensera und 30 Spenderzellen. Dabei werden die Ergebnisse mit dem komplementabhängigen Zytotoxizitätstest und Luminex- SAB Ergebnissen nach HLA- Loci, HLA- Klasse sowie auch mögliche Unterschiede in der MFI-Intensität aller detektierten Antikörper verglichen. Der C1q- Screen Test zeigt eine gute Korrelation mit dem Luminex Single Bead assay (~43%), gegenüber dem Zytotoxizitätstest konnte eine größere Anzahl an zytotoxischen HLA- Antikörpern nachgewiesen werden, was auf eine höhere Sensitivität hinweisen könnte; diese höhere Sensitivität und deren klinische Bedeutung konnte im Rahmen dieser Studie jedoch nicht bestätigt werden.

Abstract (English)

Humoral rejection caused by the presence of HLA- specific complement- binding antibodies remains to be an obstruction in transplantation medicine. To achieve the best possible transplantation results and avoid futile transplantation attempts resulting in graft failure, a pre-transplant evaluation of the patients’ sera is done to recognize and eliminate possible risk factors, in this case complement- binding antibodies against HLA- antigens. The currently used methods for the detection of such antibodies are the gold-standard complement-dependent cytotoxicity test and the Luminex based single antigen bead assay, which shows better sensitivity and specificity. The new C1q-Screen Kit, established by One Lambda, US, is, according to the company, able to combine the advantages of both methods in one single test. It could serve as a possible alternative at the Department for Blood Group Serology and Transfusion Medicine at the Medical University of Vienna, Austria. The aim of this study will be comparing the results of 30 patients’ sera, which were tested with the C1q-Screen, the complement- dependent cytotoxicity and Luminex- based single antigen bead assay. The test results were matched using HLA- Loci and specificity, as well as HLA- class and mean fluorescent intensities of each detected antibody. The C1q- Screen assay showed good correlation with Luminex Single Antigen Bead Assay (~43%), in comparison to cytotoxicity test more cytotoxic HLA- antibodies could be detected with C1q- Assay; that could be, however, a hint for higher sensitivity, but this higher sensitivity and their clinical relevance could not be confirmed within this study.