Bibliographic Metadata

Title
GMP-Produktion von rekombinantem BlitzBlau (rBB) Downstream Process UnitOperation Anion Excange Chromatography
Additional Titles
GMP-Produktion of rekombinant Blitzen Blue (rBB) Downstream Process UnitOperation Anion Excange Chromatography
AuthorPeter, Daniel
Thesis advisorBliem, Rudolf Friedrich ; Maurer, Michael
Published2016
Date of SubmissionJuly 2016
LanguageGerman
Document typeBachelor Thesis
Keywords (DE)Blitzblau / rekombinant / blaues fluoreszierendes Protein / Downstreamprocessing / Chromatographie / Ionenaustauschchromatographie / Anionenaustauschchromatographie / ÄKTApilot / AxiChrom / CaptoQ
Keywords (EN)Blitzen Blue / rekombinant / blue fluorescent protein / downstreamprocessing / chromatography / ion exchange chromatography / anion exchange chromatography / ÄKTApilot / AxiChrom / CaptoQ
Restriction-Information
 _
Classification
Abstract (German)

Für die Herstellung von rekombinantem Blitzblau wird im Bereich Downstreamprocessing nach der Ultra-Diafiltration eine weitere Aufreinigung durch eine Serie von drei Chromatographien durchgeführt. Die Erste davon ist eine Anionenaustauschchromatographie.

Durch das Chromatographiesystem "ÄKTApilot" der "General Electrics Healthcare" werden

10 L Produktlösung mit einer Proteinkonzentration von 20 g/L durch 10 L Gel "GE Healthcare CaptoQ" in einer Säule "GE Healthcare AxiCrome 300" geleitet. Das Zielprotein bindet unter den Pufferbedinungen eines 50 mM TRIS/HCl Puffers (pH 8,1), wird gereinigt und durch einen

50 mM TRIS/HCl Puffer (pH 8,1) mit 1 M NaCL eluiert. Die gesammelte Fraktion umfasst 20 L mit einer Proteinkonzentration von 9 g/L. Der gesamte Prozess benötigt je nach Auslegung 11,3 bis 16,3 Stunden.

Abstract (English)

During the production of Blitzen Blue, a series of three chromatographies are run for further purification in the downstreamprocessing, after a tangential flow filtration. The first of three is an anion exchange chromatography.

Using the system "ÄKTApilot" made by "General Electrics Healthcare", 10 L product solution, containing 20 g/L protein, are pumped into 10 L chromatography gel "GE Healthcare CaptoQ" in a "GE Healthcare AxiCrome 300" column. Under the basic conditions of a 50 mM TRIS/HCl (pH 8,1) buffer, the protein will bind onto the column, then be washed and finally eluated with a 50 mM TRIS/HCl (pH 8,1) and a 1 M NaCL buffer. The collected fraction of 20 L will have at a protein concentration of 9 g/L. The whole process will take, depending on dimensioning, between 11,3 and 16,3 hours.

Stats
The PDF-Document has been downloaded 0 times.