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Title
Plazentarer Nachweis und Lokalisation von STEAP4 (Six Transmembrane Epithelial Antigen of Prostate 4) und SCARA5 (Scavenger Receptor Class A Member 5)
Additional Titles
Placental detection and localization of STEAP4 (Six Transmembrane Epithelial Antigens of Prostate 4) and SCARA5 (Scavenger Receptor Class A Member 5)
AuthorAigelsreiter, Julia
Thesis advisorJäger, Silke
Published2018
Date of SubmissionJune 2018
LanguageGerman
Document typeBachelor Thesis
Keywords (DE)STEAP4 / SCARA5 / Plazenta / Antikörpervalidierung / SDS-PAGE / Western Blot / Proteinexpression / Immunfluoreszenzmikroskopie / Plazentare Lokalisation
Keywords (EN)STEAP4 / SCARA5 / Placenta / Antibody validation / SDS-PAGE / Western blot / Protein expression / Immunofluorescence mikroskopy / Placental localization
Restriction-Information
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Classification
Abstract (German)

Viele Frauen weltweit leiden unter einem Eisenmangel während der Schwangerschaft. Dadurch kann sich beispielsweise das Gehirn des Fetus nicht optimal entwickeln. Die Eisensupplementationen die derzeit angewendet werden versuchen einem Eisenmangel entgegen zu wirken, erbringen jedoch keine zufriedenstellende Ergebnisse. Um die Therapie mit Eisen während der Schwangerschaft verbessern zu können ist es wichtig den plazentaren Eisenmetabolismus genauer zu charakterisieren.

STEAP4 ist eine Eisenreduktase, die möglicherweise am Eisentransport in der humanen Plazenta beteiligt ist. Die mRNA Expression von STEAP4 wurde in der Plazenta bereits durch andere Studien bestätigt, zur Proteinexpression und Lokalisation in der Plazenta ist jedoch noch nichts bekannt. Der Multiligand-Rezeptor SCARA5 kann an Serumferritin-gebundenes Eisen internalisieren. Seine plazentare Expression und Rolle im plazentaren Eisenmetabolismus wurde noch nicht untersucht.

Diese Arbeit beschäftigte sich damit, die Proteinexpression der beiden Kandidatenproteine in der humanen Plazenta zu untersuchen. Dafür wurden Plazentalysate und die Positivkontrolle (Fettgewebe) mittels SDS-PAGE aufgetrennt und Western Blots mit den in der vorangegangenen Bachelorarbeit 1 recherchierten Antikörpern durchgeführt. Die Expression von STEAP4 in Plazenta sowie in Fettgewebe konnte bestätigt werden. STEAP4 wurde mit Immunfluoreszenzmikroskopie an der apikalen und der basalen Plasmamembran sowie in intrazellulären Kompartimenten des Synzytiotrophoblasten, in den Endothelzellen der fetalen Kapillaren und den plazentaren Makrophagen lokalisiert. Die Proteinexpression von SCARA5 in der humanen Plazenta konnte mit dem recherchierten Antikörper nicht festgestellt werden, darum wurde auch keine Lokalisation durchgeführt.

Abstract (English)

Many women worldwide suffer from iron deficiency during pregnancy. As a result, for example, the fetal brain can not develop optimally. The iron supplementation that is currently being used is trying to counteract iron deficiency, but does not provide satisfactory results. In order to be able to improve iron therapy during pregnancy, it is important to further characterize the placental iron metabolism.

STEAP4 is an iron reductase that may be involved in iron transport in the human placenta. The mRNA expression of STEAP4 has been confirmed in the placenta by other studies, but there is no information available on protein expression and localization in the placenta. The multiligand receptor SCARA5 can internalize serum ferritin-bound iron. Its placental expression and role in placental iron metabolism has not been studied.

This thesis was concerned with investigating the protein expression of the two candidate proteins in the human placenta. For this purpose, placental lysates and the positive control (adipose tissue) were separated in a SDS-PAGE and Western blots were performed using the antibodies investigated in the preceding thesis 1. The expression of STEAP4 in placenta as well as in adipose tissue could be confirmed. STEAP4 was localized by immunofluorescence microscopy on the apical and basal plasma membranes as well as in intracellular compartments of the syncytiotrophoblast, in the endothelial cells of the fetal capillaries, and in the placental macrophages. The protein expression of SCARA5 in the human placenta could not be detected with the investigated antibody, therefore no localization was performed.