Bibliographic Metadata

Title
Biopharmazeutischer Herstellungsprozess von humanem Serumalbumin mit Pichia pastoris - TFF / Formulierung
Additional Titles
Biopharmaceutical production process of human serum albumin using Pichia pastoris - TFF / Formulation
AuthorSchneider, Fabian
Thesis advisorBliem, Rudolf Friedrich ; Maurer, Michael
Published2018
Date of SubmissionJune 2018
LanguageGerman
Document typeBachelor Thesis
Keywords (DE)Produktionsprozess / Downstream Processing / Humanes Serumalbumin / Pichia pastoris / TFF / Formulierung / Ultrafiltration / Diafiltration / Ultra-/Diafiltration
Keywords (EN)Production process / Downstream processing / Human serum albumin / Pichia pastoris / TFF / Formulation / Ultrafiltration / Diafiltration / Ultra-/Diafiltration
Restriction-Information
 _
Classification
Abstract (German)

Im Zuge unseres Gruppenprojektes sollte ein biopharmazeutischer

Produktionsprozess zur Produktion von humanem Serumalbumin (HSA) in der

Hefe Pichia pastoris konzeptioniert und ausgelegt werden. Es wurden

verschiedene technische und qualitätsbezogene Dokumente erstellt, wobei jede

Person für einen eigenen Bereich bzw. Prozessschritt verantwortlich war.

In dieser Bachelorarbeit sind alle erstellten Dokumente zur „TFF/Formulierung“

im Appendix zusammengefasst. Sie beschreiben - wenn nötig - beide oder nur

einen der beiden im Produktionsprozess vorgesehenen TFF-Schritte

(Tangentialflussfiltration, Prozessschritte 07.1 & 07.2). Im Detail sind dies:

Ein R&I-Schema, ein Lastenheft (URS, User Requirement Specification), eine

Standardarbeitsanweisung (SOP, Standard Operating Procedure) und zwei

daraus entwickelte Chargenprotokolle (MBR, Master Batch Record) und eine

Risikoanalyse.

Beide TFF-Schritte sind als Ultra-/Diafiltrationen geplant und dienen sowohl der

Reduktion des Volumens der HSA-Lösung (Ultrafiltration) als auch dem

anschließenden Puffertausch (Ultra-/Diafiltration). Am Ende der TFF liegt das

Produkt HSA im gewünschten Volumen des Austauschpuffers vor.

Abstract (English)

The aim of our group project for the bachelor thesis was to develop a

biopharmaceutical production process to produce human serum albumin (HSA)

using the yeast Pichia pastoris. In the course of the project different technical

and quality-related documents were set up, each person being responsible for a

particular operation unit within the production process.

Compiled in the appendix of this bachelor thesis, all documents regarding

‘TFF/Formulation’ can be found. One of the core documents is a Standard

Operating Procedure (SOP) that describes all necessary actions to carry out both

TFF (tangential flow filtration) steps in the production process (steps 07.1 &

07.2).

Both TFF systems are designed to run ultra-/diafiltrations of solutions containing

HSA. To prepare the system for operation the single-use membrane is installed,

rinsed with water for injection, tested for integrity and conditioned with the

respective buffer. After taking over the intermediate product from the previous

operation unit it is collected in the feed tank. The volume of the solution is first

reduced in a continuous ultrafiltration process. When the desired final volume is

reached, exchange buffer is constantly added to the solution in the feed tank,

keeping the volume constant (ultra-/diafiltration). The process is controlled via

the process control system. Here, the most important control parameters are the

flow rate and the transmembrane pressure. The two parameters used to monitor

the final point of the filtration are the volume of total solution processed

(diafiltration volumes) and the conductivity of the solution. When these reach the

expected values the filtration is considered successful. The HSA is now in the

desired volume of exchange buffer. To finalize the process step, the HSA solution

is pumped via a sterile filter to the pre-sterilized hold tank or formulation tank,

respectively. The TFF system is cleaned and shut down.